Конидии клиничеcкого штамма Aspergillus niger 2306, «Альфа-06»

  • Грибы
  • Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Москва
  • 2018 г.
Посмотреть документ

НАУЧНЫЙ ОТЧЕТ
по результатам изучения эффективности обеззараживания поверхностей, контаминированных конидиями клинического штамма Aspergillus niger, с применением Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-06»

Цель испытаний: изучение активности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого импульсной установкой «Альфа-06», в отношении конидий клинического штамма Aspergillus niger.

Задача НИР: Определение эффективности обеззараживания открытых поверхностей, контаминированных конидиями Aspergillus niger, импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра, генерируемым импульсной установкой «Альфа-06».

Работы выполнены в соответствии с договором № 85 от 20.04.2018 г.

Место и время проведения испытаний: ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, сентябрь-декабрь 2018 года.

Материалы и методы

Оборудование:

Опытный образец Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-06» (далее установка «Альфа-06»).

Тест-поверхности: стерильные пластиковые чашки Петри одноразового использования.

Питательные среды:

  • питательная среда Сабуро.

Характеристика клинического штамма: клинический штамм Aspergillus niger 2306 изолирован в ФБУН МНИИЭМ от пациента с клинической картиной грибковой инфекции верхних дыхательных путей.

Исследования эффективности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого установкой «Альфа-06», проводили в соответствии с представленной ниже схемой эксперимента:

  1. подготавливали вертикальную поверхность для крепления на них чашек Петри;

  2. чашки Петри крепили на одной высоте с лампой установки «Альфа-06»;

  3. установку располагали на расстоянии 2 м к подготовленной вертикальной поверхности;

  4. включали установку в сеть;

  5. в соответствии с руководством по эксплуатации нажимали кнопку включения и устанавливали требуемое время;

  6. включали установку в режим генерации вспышек.

Методология исследования:

  1. В пробирку со скошенным агаром (питательная среда Сабуро) вносят микробиологической петлей культуру Aspergillus niger и экспонируют в термостате 5 суток при 30˚С.

  2. По истечении срока экспонирования, в пробирку внося 10 мл стерильного физиологического раствора и микробиологической петлей отделяют выросшую культуру Aspergillus niger от скошенного агара.

  3. Полученную смесь физиологического раствора и культуры Aspergillus niger фильтруют через стерильную марлевую салфетку для отделения конидий.

  4. Образовавшуюся суспензию из физиологического раствора и конидий Aspergillus niger на приборе денситометре доводят до плотности 1 MсF, что соответствует 106 КОЕ/мл.

  5. После ряда разведений, культуру наносят на поверхность питательной среды Сабуро, разлитой в чашки Петри, и облучают в соответствии с техническим заданием.

  6. Облученные чашки инкубируют в термостате при 30˚С.

  7. Учет выросших колоний начинают на 3 сутки. Отрицательный контроль роста дается на 7 сутки.

Исследования проводили в двух повторностях для каждого временного режима, удаленности от облучателя и вида микроорганизмов

Эффективность установки «Альфа-06» в отношении конидий Aspergillus niger (%) вычисляли по формуле: (среднее количество спор на контрольных чашках — среднее количество спор на опытных чашках): среднее количество спор на контрольных чашках х 100.

Для средств химической дезинфекции при обработке поверхностей помещений и объектов больничной среды принят критерий эффективности режимов применения 99,99% (4lg). Для изучаемого метода критерии эффективности профилактической и очаговой дезинфекций поверхностей не разработаны, но они не могут быть меньше указанного уровня.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты изучения эффективности импульсного ультрафиолетового излучения, генерируемого установкой «Альф-06», в отношении конидий клинического штамма Aspergillus niger, нанесенных на вертикально ориентированные пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстоянии 2-х метров от лампы установки при разном времени воздействия, представлены в таблице 1.

Таблица 2. Эффективность установки «Альфа-06» в отношении конидий клинического штамма Aspergillus niger при разном времени воздействия на расстоянии 2 метра от источника облучения.

Время воздействия, мин

Количество выживших конидий, КОЕ

Эффективность

%

lg

5

(17, 14, 20)∙101

ср. 12,5∙101

97,9

1,69

6,5

28, 18, 24

ср. 23,3

99,7

2,55

10

13, 14, 16

ср. 14,3

99,8

2,76

Контроль – 8,333∙103 КОЕ

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Результаты выполненных исследований показали, что импульсное ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, генерируемое установкой «Альфа-06», обладает выраженным фунгицидным действием.

На расстоянии 2-х метров от установки «Альфа-06» конидии клинического штамма Aspergillus niger были уничтожены импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра на 97,9% (1,69 lg) за 5 минут, на 99,7% (2,55 lg) за 6,5 минут и на 99,8% (2,76 lg) за 10 минут воздействия.

Известно, что конидии Aspergillus niger обладают самой высокой устойчивостью среди микроорганизмов к средствам и методам дезинфекции.

Результаты выполненных исследований показали, что импульсное ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, генерируемое установкой «Альфа-06», обладает выраженным фунгицидным действием. При облучении тест-объектов, контаминированных конидиями клинического штамма Aspergillus niger с временной экспозицией 6,5 мин была получена эффективность более 99,5%. Изучаемый метод совместим с большинством материалов поверхностей МО, применяется в отсутствии людей, но после короткой экспозиции не имеет вредных побочных продуктов.

ВЫВОДЫ:

  1. Экспериментально показана высокая эффективность импульсной ультрафиолетовой установки «Альфа-06», генерирующей ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, при обеззараживании тест-поверхностей, контаминированных конидиями клинического штамма Aspergillus niger, которые обладают экстремально высокой устойчивостью к средствам химической дезинфекции.
  2. Установлено, что эффективность обеззараживания поверхностей, расположенных на расстоянии 2 метра от установки «Альфа-06» и контаминированных конидиями клинического штамма Aspergillus niger, составляет более 99,5% за 6,5 минут воздействия. 
  3. Проведенные исследования позволяют рекомендовать импульсные ультрафиолетовые установки «Альфа-06» к широкому использованию лечебно-профилактическими организациями всех направлений деятельности при проведении комплекса дезинфекционных мероприятий (профилактическая и очаговая дезинфекция), особенно в помещениях, пораженных плесневыми грибами.