- Бактерии
- Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Москва
- 2015 г.
Научный отчет
по результатам проведения научных исследований по изучению эффективности импульсного УФ излучения сплошного спектра в отношении Mycobacterium terraе
Цель исследований: Определение активности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого УИКб-01-«Альфа», в отношении тестового штамма микобактерии терра.
2. Задачи НИР:
-
Определение эффективности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого УИКб-01-«Альфа», в отношении микобактерий терра (тестовый штамм), нанесённых на вертикально ориентированные пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстоянии 2 и 4 метра от источника облучения при различном времени воздействия.
-
Разработка практических рекомендаций по обеззараживанию поверхностей в ЛПО туберкулезного профиля при помощи УИКб-01-«Альфа»
Работы выполнены в соответствии с договором № 62 от 10.02.2015 г.
Место и время проведения испытаний: ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора.
Материалы и методы
Оборудование: Установка импульсная ксеноновая УФ-бактерицидная для экстренной дезинфекции воздуха помещений 1 и 2 категории при отсутствии людей УИКб-01-«Альфа» производство ООО «НПП «Мелитта», Россия (Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/06906 от 26.02.2010 г.; Сертификат соответствия ГОСТ Р № РОСС RU.ИМ04.H08492 по 25.09.2016 г.).
Время воздействия - от.
Тест-поверхности: стерильные пластиковые чашки Петри
Характеристика объекта исследования: Mycobacterium terraе штамм
DSM 43227 ATCC 15755, выпуск 06.2011г. в виде суспензии, приготовленной по оптическому стандарту (109 КОЕ/мл). Тест микобактерии приобретены в Немецком музее микроорганизмов и клеточных культур в октябре 2011г.
Методика исследования эффективности обеззараживания поверхностей:
Cуточную взвесь культуры Mycobacterium terraе готовили по отраслевым стандартным образцам мутности 1х109 на физиологическом растворе. Проводили контроль жизнеспособности культуры (не мене 3-х повторностей). Для получения взвеси 1х107 проводили два серийных разведения с контролем жизнеспособности культуры в 3-х повторностях.
Для выращивания Mycobacterium terraе использовали среду Левенштейна-Йенсена.
При помощи микропипетки наносили 100 мкл микробной смеси на дно стерильной чашки Петри, растирали шпателем и подсушивали. Проводили облучение, затем добавляли 9,9 мл стерильного физиологического раствора, перемешивали круговыми движениями и делали 3 серийных разведения. Из каждого разведения делали по три высева на косяки со средой Левенштейна-Йенсена. Через 21 день инкубации при 37оС проводили подсчет выживших клеток (опыт).
Контроль проводили аналогично опыту, но без облучения. В чашке к 100 мкл микробной смеси добавляли 9,9мл физиологического раствора, размешивали круговыми движениями и делали серийные разведения с последующим высевом на плотные питательные среды для подсчета колоний.
Эффективность обработки устанавливали по формуле: (среднее количество колоний на контрольных чашках — среднее количество колоний на опытных чашках): среднее количество колоний на контрольных чашках 100.
Исследования проводили в трёх повторностях для каждого временного режима и расстояния от источника облучения до тест-поверхности.
Облучение вертикально расположенных тест-поверхностей, контаминированных Mycobacterium terraе, проводили при следующих параметрах:
-
расстояние 2 метра от лампы установки. Время облучения 1, 2, 5, 10 мин.; 2,4, 8,16 минут.
-
расстояние 4 метра от лампы установки. Время облучения 4, 8, 20 минут; 8, 16, 30минут.
Проведено 2 серии экспериментов.
Результаты исследований:
В первой серии экспериментов исследования проводилась с использованием микробной взвеси с плотностью 1х109КОЕ/мл и 1х107КОЕ/мл при расстоянии облучателя до контаминированных тест-поверхностей 2 метра. Результаты представлены в таблице№1
Таблица 1. Эффективность воздействия импульсного УФ излучения сплошного спектра, генерируемого УИКб-01-«Альфа», на микробную взвесь микобактерий терра с плотностью 109 КОЕ/мл и 107 КОЕ/мл, нанесенную на вертикально ориентированные пластиковые тест поверхности, расположенные на расстоянии 2 метра от излучателя при различном времени.
Плотность микробной взвеси 109КОЕ/мл |
|||||||
Разведение |
Кол-во посевного материала
|
Плотность контаминации (КОЕ/мл)
|
Количество выживших клеток (КОЕ) после облучения при времени, опыт |
||||
2 минуты |
4 минуты |
8 минут |
16 минут |
||||
10-3
|
1 000 000 |
ср. 1,1 х106 |
>300 |
>300 |
ср.91,7
|
0 |
|
10-4
|
100 000 |
ср. 1,0х105 |
>300 |
ср. 51
|
ср.7,3
|
0 |
|
10-5
|
10 000 |
ср. 1,1х104 |
ср.90
|
ср.5,3
|
ср.1
|
0 |
|
Эффективность,% |
|
|
99,2 |
99,95 |
99,99 |
100 |
|
плотность микробной взвеси 107КОЕ/мл |
|||||||
Разведение
|
Кол-во посевного материала (КОЕ/мл) |
Плотность контаминации (КОЕ/мл) контроль |
Количество выживших клеток (КОЕ) после облучения при времени, опыт |
||||
2 минуты |
4 минуты |
8 минут |
16 минут |
||||
10-3 |
10000 |
ср.1,0х104 |
ср.110 |
ср.4,3 |
ср.1,0 |
0 |
|
10-4 |
1000 |
ср. 0,9х103 |
ср.0,3 |
0 |
0 |
0 |
|
10-5 |
100 |
ср.110 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
Эффектив-ность,% |
|
|
98,9 |
99,96 |
99,99 |
100 |
Из данных, представленных в таблице №1, следует, что при 99,99% эффективность импульсного УФ излучения сплошного спектра в отношении микобактерий терра, нанесенных на вертикально ориентированные пластиковые тест поверхности, расположенные на расстоянии 2 метров от излучателя, достигается за 8 минут, 100% эффективность - за 16 минут.
Уровень инициальной контаминации тест-поверхностей (109 КОЕ/мл и 107 КОЕ/мл) не оказал влияния на результаты исследования.
Вторая серия экспериментов проводилась с использованием микробной взвеси с исходной плотностью 1х107КОЕ/мл при расстоянии облучателя до контаминированных микобактериями тест-поверхностей 4 метра. Результаты представлены в таблице№4
Таблица 4. Эффективность воздействия импульсного УФ излучения сплошного спектра, генерируемого УИКб-01-«Альфа», на микробную взвесь микобактерий терра с плотностью 107 КОЕ/мл, нанесенную на вертикально ориентированные пластиковые тест поверхности, расположенные на расстоянии 4 метра от излучателя при различном времени.
Разведение
|
Кол-во посевного материала
|
Плотность контаминации (КОЕ/мл)
|
Количество выживших клеток (КОЕ) после облучения при времени, опыт |
||
8мин |
16мин |
30 мин |
|||
10-3 |
10000 |
Ср.1,06х104 |
Ср.9,3 |
Ср.1,7 |
0 |
10-4 |
1000 |
Ср.1,13х103 |
Ср.1,7 |
Ср.0,3 |
0 |
10-5 |
100 |
Ср.113 |
0 |
0 |
0 |
Эффектив-ность, % |
|
|
99,8 |
99,97 |
100 |
Результаты, полученные во второй серии экспериментов свидетельствуют о том, что увеличение расстояния от источника излучения до контаминированных тест-поверхностей приводит к снижению эффективности импульсного УФ излучения сплошного спектра. При расстоянии 4 метра от источника излучения до контаминированных микобактериями тест-поверхностей 99,97% эффективность была достигнута за 16 минут воздействия, а 100%-за 30 минут.
Полученные в обоих сериях экспериментов уровни бактерицидной эффективности обеззараживания контаминированных микобактериями терра тест-поверхностей с помощью УИКб-01-«Альфа» находятся на уровне или превышают критерий эффективности, принятый для дезинфицирующих средств, применяемых в режиме дезинфекции поверхностей помещений и объектов больничной среды (99,99%)(Руководство Р 4.2.2643-10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности», М. 2011 г.).
Выводы:
-
Импульсное УФ излучение сплошного спектра, генерируемое УИКб-01-«Альфа», обладает высокой микобактерицидной активностью:
- 99,99% эффективность достигается за 8 минут, 100% - за 16 минут при расстоянии от облучателя до вертикально ориентированных тест-поеврхностей 2 метра,
- 100% эффективность достигается за 30 минут при расстоянии от облучателя до вертикально ориентированных тест-поеврхностей 4 метра.
- Микобактерицидная активность УИКб-01-«Альфа» не зависит от плотности микробной контаминации тест-поверхностей.
Практические рекомендации для медицинских организаций.
-
Включать УИКб-01-«Альфа» в комплекс дезинфекционных мероприятий (очаговая дезинфекция поверхностей и воздуха помещений) медицинских организаций туберкулезного профиля. Основание - высокая микобактерицидная эффективность (не менее 99,99%).
-
Использовать УИКб-01-«Альфа» в отделениях пульмонологии и рентгенологии, в которых отмечается высокий риск заноса и распространения возбудителей туберкулёза для проведения очаговой дезинфекции поверхностей и воздуха помещений.