- Бактерии
- Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Москва
- 2018 г.
НАУЧНЫЙ ОТЧЕТ
по результатам изучения эффективности обеззараживания поверхностей, контаминированных тестовым и клиническим штаммами золотистого стафилококка, с применением Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-06»
Цель испытаний: изучение активности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого импульсной установкой «Альфа-06», в отношении тестового и клинического штаммов золотистого стафилококка.
Задача НИР:
-
Обоснование режимов обеззараживания открытых поверхностей, контаминированных тестовым и клиническим штаммами S.aureus, импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра, генерируемым установкой «Альфа-06».
-
Определение влияния органических загрязнений на эффективность обеззараживания поверхностей, контаминированных клиническим и тестовым штаммами S.aureus, импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра, генерируемым импульсной установкой «Альфа-06».
Работы выполнены в соответствии с договором № 85 от 20.04.2018г. и №114 от 18.06.2018 г.
Место и время проведения испытаний: ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, сентябрь-декабрь 2018 года.
Материалы и методы
Оборудование:
- Опытный образец Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-06» (далее установка «Альфа-06»).
Тест-поверхности: стерильные пластиковые чашки Петри одноразового использования.
Питательные среды: агаризованная питательная среда ЖСА.
Характеристика штамма: МRSA шт.02840 - устойчив к бета-лактамным антибиотикам, бензилпенициллину и полусинтетическим пенициллинам (к 7 из 16 тестируемых антибиотиков).
Тестовый штамм Staphylococcus aureus шт. 906, используемый для тестирования эффективности средств химической дезинфекции.
В качестве органического загрязнителя использовали Сыворотку лошадиную нормальную для бактериологических питательных сред жидкую (производитель НПО Микроген ФГУП, Россия) раствор для микробиологических целей: 100 мл, фл., с.40, выпущена 03.2018 г., срок годности -04.2019, Рег. № ЛС-002083.
Исследования эффективности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого установкой «Альфа-06», проводили в соответствии с представленной ниже схемой эксперимента:
-
подготавливали вертикальную поверхность для крепления на них чашек Петри;
-
чашки Петри крепили на одной высоте с лампой установки «Альфа-06»;
-
установку располагали на расстоянии 2 м к подготовленной вертикальной поверхности;
-
включали установку в сеть;
-
в соответствии с руководством по эксплуатации нажимали кнопку включения и устанавливали требуемое время;
-
включали установку в режим генерации вспышек.
Методология исследования:
- Приготовление суточной культуры стафилококка на агаризованной питательной среде ЖСА,
- Приготовление рабочей суспензии, доведя до плотности 3,3 MсF, что соответствует 109 КОЕ/мл. Контроль жизнеспособности культуры.
- Проводили контроль жизнеспособности культуры (Руководство по медицинской микробиологии под редакцией А.С. Лабинской, Е.Г. Волиной, Е.П. Ковалевой.-М.:Издательство БИНОМ,2014.-880с.;ил. в 3-х томах,)
- Заданный техническим заданием объем полученной суспензии наносили на центр пластиковой стерильной чашки Петри и облучали в течение времени, указанного в техническом задании.
- После облучения в пластиковую чашку добавляли 9,9 мл физиологического раствора. Тщательно встряхивали и проводили ряд серийных разведений.
- Из серийных разведений, установленных ТЗ, проводили высевы на плотную агаризованную питательную среду ЖСА
- Инкубировали чашки в термостате при 37˚С в течение 48 часов.
- Проводили подсчет колоний
Контрольные чаши и пластины не подвергали облучению. Все остальные действия проводили в соответствии с п.4-7. Все исследования проводили в 3-х последовательностях.
Эффективность установки «Альфа-06» в отношении S.aureus (%) вычисляли по формуле: (среднее количество колоний на контрольных чашках — среднее количество колоний на опытных чашках): среднее количество колоний на контрольных чашках х 100.
Для средств химической дезинфекции при обработке поверхностей помещений и объектов больничной среды принят критерий эффективности режимов применения 99,99% (4lg). Для изучаемого метода критерии эффективности при проведении профилактической и очаговой дезинфекций поверхностей не разработаны, но они не могут быть меньше указанного уровня.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Результаты изучения эффективности импульсного ультрафиолетового излучения, генерируемого установкой «Альфа-06», в отношении клинического штамма МRSA и тестового штамма S.aureus 906, нанесенных на вертикально ориентированные пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстоянии 2-х метров от лампы установки при разном времени воздействия, а также при наличии и отсутствии биологической нагрузки, представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1. Эффективность установки «Альфа-06» в отношении клинического штамма МRSA, нанесенного на тест-поверхности из пластика, расположенные вертикально на расстоянии 2 и 4 метра от источника излучения при разном времени воздействия с белковой нагрузкой и без нее.
Время облучения, минуты |
Результат, КОЕ |
Контроль, КОЕ |
Эффективность |
|
% |
lg |
|||
Расстояние до лампы 2 метра. Пластик, без биологической нагрузки |
||||
Не облучали |
|
3,2*105 |
- |
- |
1 |
37,7 |
|
99,98 |
3,92 |
2 |
5,3 |
|
99,998 |
4,77 |
Расстояние до лампы 2 метра. Пластик, Микробная взвесь+ биологическая нагрузка |
||||
Не облучали |
|
1,1*106 |
- |
|
1 |
133,3 |
|
99,98 |
3,93 |
2 |
79,0 |
|
99,99 |
4,16 |
4 |
28,0 |
|
99,997 |
4,61 |
Расстояние до лампы 4 метра. Пластик, без биологической нагрузки |
||||
Не облучали |
|
3,27*105 |
- |
|
1 |
733,3 |
|
99,78 |
2,64 |
2 |
207,0 |
|
99,93 |
3,19 |
4 |
5,0 |
|
99,998 |
4,91 |
Таблица 2. Эффективность установки «Альфа-06» в отношении тестового штамма S. Aureus 906 без белковой нагрузки, нанесенного на тест-поверхности из пластика, расположенные вертикально на расстоянии 2 метра от источника излучения при 2 минутах воздействия.
Время облучения, мин. |
Результат КОЕ |
Эффективность |
|
% |
lg |
||
расстояние от установки 2м. |
|||
2 |
0,0,0 ср. 0 |
100% |
4,68 |
Контроль – 4, 878 х104 КОЕ Контроль жизнеспособности – 2,9х 108 КОЕ/мл |
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Результаты выполненных исследований показали, что импульсное ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, генерируемое установкой «Альфа-06», обладает выраженным бактерицидным действием.
При облучении пластиковых чашек Петри, контаминированных клиническим штаммом МRSA и размещенных на расстоянии 2 м от установки, в течение 2 минут получена эффективность 99,998%.
Введение биологической нагрузки незначительно снизило эффективность (с 99,998% до 99,992%), при 2-х минутной экспозиции.
Увеличение расстояния от источника излучения до пластиковых чашек с 2-х до 4-х метров привело к падению эффективности при 2-х минутной экспозиции с 99,998% до 99,93 %. Достичь редукции, превышающей 4lg (эффективность 99,998%) удалось при увеличении времени облучения с 2-х до 4-х минут.
ВЫВОДЫ:
- Экспериментально доказана высокая эффективность импульсной ультрафиолетовой установки «Альфа-06», генерирующей ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, при обеззараживании пластиковых поверхностей, контаминированных клиническим и тестовым штаммами S. Aureus.
- Установлено, что эффективность УФ-излучения, генерируемого импульсной установкой «Альфа-06», в отношении клинического штамма МRSA (с биологической нагрузкой и без нее), нанесенного на пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстоянии 2 метра от установки, составляет более 99,99% при 2 минутах воздействия.
- Увеличение расстояния от источника излучения до тестовых поверхностей в два раза (с 2-х до 4-х метров) потребовало увеличения времени облучения с2-х до 4-х минут для обеспечения эффективности более 99,99%. Увеличение расстояния до обрабатываемой поверхности не приводит к снижению бактерицидной активности импульсного УФ-излучения сплошного спектра.
- Полученные в исследованиях уровни эффективности импульсной ультрафиолетовой установки «Альфа-06» соответствуют критериям эффективности, принятым для дезинфицирующих средств, применяемых в режиме дезинфекции поверхностей помещений и объектов больничной среды (99,99%) (Руководство Р 4.2.2643-10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности», М. 2011 г.)
- Проведенные исследования позволяют рекомендовать передвижные импульсные ультрафиолетовые установки «Альфа-06» к применению в медицинских организациях всех профилей:
- при проведении в помещениях всех видов профилактической дезинфекции, особенно в помещениях классов чистоты А и Б;
- при проведении очаговой дезинфекции открытых поверхностей в помещениях, контаминированных бактериями с множественной устойчивостью к антимикробным препаратам и дезинфицирующим средствам;
- при обеззараживании поверхностей в помещениях в условиях их биологического загрязнения (кровь, моча, мокрота).