Staphylococcus aureus, штамм 906, «Альфа-09»

• Бактерии
• Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Москва
• 2018 г.

НАУЧНЫЙ ОТЧЕТ
по результатам изучения эффективности обеззараживания поверхностей, контаминированных тестовым и клиническим штаммами золотистого стафилококка, с применением Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-09»

Цель испытаний: изучение активности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого импульсной установкой «Альфа-09», в отношении тестового и клинического штаммов золотистого стафилококка.

Задача НИР:

1. Обоснование режимов обеззараживания открытых поверхностей, контаминированных тестовым и клиническим штаммами S.aureus, импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра, генерируемым установкой «Альфа-09».

2. Определение влияния органических загрязнений на эффективность обеззараживания поверхностей, контаминированных клиническим и тестовым штаммами S.aureus, импульсным ультрафиолетовым излучением сплошного спектра, генерируемым импульсной установкой «Альфа-09».

Работы выполнены в соответствии с договором №114 от 18.06.2018 г.

Место и время проведения испытаний: ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, сентябрь-декабрь 2018 года.

Материалы и методы

Оборудование:

• Опытный образец Установки импульсной ультрафиолетовой передвижной для обеззараживания воздуха и поверхностей помещений «Альфа-09» (далее установка «Альфа-09»).

Тест-поверхности: стерильные пластиковые чашки Петри одноразового использования.

Питательные среды: агаризованная питательная среда ЖСА

Характеристика штамма: МRSA шт.02840 - устойчив к бета-лактамным антибиотикам, бензилпенициллину и полусинтетическим пенициллинам (к 7 из 16 тестируемых антибиотиков).

Тестовый штамм Staphylococcus aureus шт. 906, используемый для тестирования эффективности средств химической дезинфекции.

Исследования эффективности импульсного ультрафиолетового излучения сплошного спектра, генерируемого установкой «Альфа-09», проводили в соответствии с представленной ниже схемой эксперимента:

1. подготавливали вертикальную поверхность для крепления на них чашек Петри;

2. чашки Петри крепили на одной высоте с лампой установки «Альфа-09»;

3. установку располагали на расстоянии 2 м к подготовленной вертикальной поверхности;

4. включали установку в сеть;

5. в соответствии с руководством по эксплуатации нажимали кнопку включения и устанавливали требуемое время;

6. включали установку в режим генерации вспышек.

Методология исследования:

1. Приготовление суточной культуры стафилококка на агаризованной питательной среде ЖСА,
2. Приготовление рабочей суспензии, доведя до плотности 3,3 MсF, что соответствует 10⁹ КОЕ/мл. Контроль жизнеспособности культуры.
3. Проводили контроль жизнеспособности культуры (Руководство по медицинской микробиологии под редакцией А.С. Лабинской, Е.Г. Волиной, Е.П. Ковалевой.-М.:Издательство БИНОМ,2014.-880с.;ил. в 3-х томах,)
4. Заданный техническим заданием объем полученной суспензии наносили на центр пластиковой стерильной чашки Петри и облучали в течение времени, указанного в техническом задании.
5. После облучения в пластиковую чашку добавляли 9,9 мл физиологического раствора. Тщательно встряхивали и проводили ряд серийных разведений.
6. Из серийных разведений, установленных ТЗ, проводили высевы на плотную агаризованную питательную среду ЖСА
7. Инкубировали чашки в термостате при 37˚С в течение 48 часов.
8. Проводили подсчет колоний.

Контрольные чаши и пластины не подвергали облучению. Все остальные действия проводили в соответствии с п.4-7. Все исследования проводили в 3-х последовательностях. 

Эффективность установки «Альфа-09» в отношении S.aureus (%) вычисляли по формуле: (среднее количество колоний на контрольных чашках — среднее количество колоний на опытных чашках): среднее количество колоний на контрольных чашках х 100.

Для средств химической дезинфекции при обработке поверхностей помещений и объектов больничной среды принят критерий эффективности режимов применения 99,99% (4lg). Для изучаемого метода критерии эффективности при проведении профилактической и очаговой дезинфекций поверхностей не разработаны, но они не могут быть меньше указанного уровня.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты изучения эффективности импульсного ультрафиолетового излучения, генерируемого установкой «Альфа-09», в отношении клинического штамма МRSA и тестового штамма S.aureus 906, нанесенных на вертикально ориентированные пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстояниях 1,5 и 2-х метров от лампы установки при разном времени воздействия, а также при наличии и отсутствии биологической нагрузки, представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1. Эффективность установки «Альфа-09» в отношении клинического штамма МRSA, нанесенного на тест-поверхности из пластика, расположенные вертикально на расстоянии 2 и 1,5 метров от источника излучения при разном времени воздействия.

Таблица 2. Эффективность установки «Альфа-09» в отношении тестового штамма S. Aureus 906, нанесенного на тест-поверхности из пластика, расположенные вертикально на расстоянии 2 метра от источника излучения при разном времени воздействия.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Результаты выполненных исследований показали, что импульсное ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, генерируемое установкой «Альфа-09», обладает выраженным бактерицидным действием.

При облучении пластиковых чашек Петри, контаминированных клиническим штаммом МRSA и размещенных на расстоянии 2 м от установки, в течение 5 минут получена эффективность 99,998% (4,08 lg), а течении 6,5 минут -100% (4,81 lg) эффективность.

Уменьшение расстояния от источника излучения до пластиковых чашек с 2-х до 1,5 метров привело к усилению эффективности. В течении 3 минут была получена 100% (4,81 lg) эффективность.

Установлена практически одинаковая эффективность установки Альфа-09 как в отношении клинического, так и тестового штамма золотистого стафилококка в тестированных режимах использования.

ВЫВОДЫ:

Экспериментально доказана высокая эффективность импульсной ультрафиолетовой установки «Альфа-09», генерирующей ультрафиолетовое излучение сплошного спектра, при обеззараживании пластиковых поверхностей, контаминированных клиническим штаммом MRSA и тестовым штаммами S. Aureus 906.

1. Установлено, что эффективность УФ-излучения, генерируемого импульсной установкой «Альфа-09», в отношении клинического штамма МRSA, нанесенного на пластиковые тест-поверхности, расположенные на расстоянии 2 метра от установки, составляет более 99,99% при 5 минутах воздействия, а на расстоянии 1,5 метров 100% эффективность достигается при 3-х минутах воздействия.
2. Показана эффективность установки «Альфа-09» на уровне 99.99% в отношении клинического штамма  МRSA и тестового штамма S. Aureus 906 , нанесенные на пластиковые тест-поверхности, при воздействии импульсного Уф-излучения в течении 2-х минут на расстоянии 2-х метров от усьановки.
3. Полученные в исследованиях уровни эффективности установки «Альфа-09» соответствуют критериям эффективности, принятым для дезинфицирующих средств, применяемых в режиме дезинфекции поверхностей помещений и объектов больничной среды (99,99%) (Руководство Р 4.2.2643-10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности», М. 2011 г.)
4. 4. Проведенные исследования позволяют рекомендовать передвижные импульсные ультрафиолетовые установки «Альфа-09» к применению в медицинских организациях всех профилей:
   • при проведении в помещениях всех видов профилактической дезинфекции , особенно в помещениях классов чистоты А и Б;
   • при проведении очаговой дезинфекции открытых поверхностей в помещениях, контаминированных бактериями с множественной устойчивостью к антимикробным препаратам и дезинфицирующим средствам.